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產(chǎn)品知識
區(qū)帶轉(zhuǎn)頭是用鋁合金做成的,或最好用欽合金,因后者能夠經(jīng)受住更高的離心力。轉(zhuǎn)頭主要由一 個轉(zhuǎn)缽和可移動的上蓋組成。中心位于轉(zhuǎn)缽的旋轉(zhuǎn)軸上,在轉(zhuǎn)缽上安有一個葉片狀裝置,把轉(zhuǎn)缽的內(nèi) 部分成四個扇狀的小室。這些葉片或間隔有輻射狀的導管能使梯度液從中心泵入到轉(zhuǎn)頭的外周。通過 葉片裝置使轉(zhuǎn)頭內(nèi)含物的旋渦作用被減小到最低程度。
轉(zhuǎn)頭的負載是在旋轉(zhuǎn)到大約3000轉(zhuǎn)/分時進行。較輕的梯度液被泵入轉(zhuǎn)頭,出現(xiàn)在周圍,由于離 心力的作用,在轉(zhuǎn)頭外壁的垂直方向上形成了均勻的一層(見圖2.62)。繼續(xù)加人較稠密的梯度液而把 較輕的梯度液不斷地推向轉(zhuǎn)頭的中心(見圖2.6b)。當梯度液已完全泵人轉(zhuǎn)頭后,將一種由于稠密或者 由于它比最重的梯度液還要稠密而被稱作“墊層”的液休引入轉(zhuǎn)頭使其完全裝滿。
然后通過引向轉(zhuǎn)頭中央的液體導管把樣品加人(見圖2.6c),然后從這里加入一種低密度的液體“ 覆蓋層”取代樣品(見圖2.6d),同時有等休積的“墊層”從周圍被取代出來。把轉(zhuǎn)頭上的梯度加液線 移去以后,轉(zhuǎn)頭被加速到所需的速度,經(jīng)過一段必要的時間以后得到了一個分級區(qū)帶或者等密度區(qū)帶 分離(見圖2.6e)。然后轉(zhuǎn)頭減到原來的3000轉(zhuǎn)/分的速度,回收梯度液和分離了的顆拉,進一步把“ 墊層”液加入到轉(zhuǎn)頭的周圍,使得轉(zhuǎn)頭中最輕一端的內(nèi)含物首先被置換出來(見圖2.6f)。
轉(zhuǎn)頭中心的設(shè)計,使得區(qū)帶能被收集,而同時又不會對離心時所達到的分辨串有任何明顯的改變 。從轉(zhuǎn)頭中央流出的梯度液通過一個適當?shù)倪B續(xù)監(jiān)測裝置(例如一個光室),根據(jù)蛋白質(zhì)在280毫微米 的紫外吸收來測定蛋白質(zhì)的含里,或者用一個適當?shù)奶綔y器來測定放射活性,然后分部收集。
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